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超凈工作臺在食用菌接種過程中的應用
超凈工作臺在一般的實驗室項目都要使用到,就比如目前發(fā)展勢頭比較好的食用菌行業(yè),對于超凈工作臺的使用更是非常有必要。
KLCFILTER通過業(yè)內人士了解到,想要建設一座年產(chǎn)杏鮑茹150噸,白靈菇180噸,金針菇150噸的液體食用菌工廠所需要的儀器設備主要有液體發(fā)酵罐2臺、過濾罐1臺、臭氧滅菌機1臺、小型蒸氣鍋爐1臺、裝袋機1臺、攪拌機1臺、粉碎機1臺、滅菌鍋1個、高壓滅菌鍋1臺、接種通道1個、超凈工作臺1臺、顯微鏡1臺、酒精燈、燒杯和燒瓶(各種型號)若干。
超凈工作臺在食用菌的接種過程中起著舉足輕重的作用,接種步驟主要要分三步走:
一.接種前首先要準備好滅菌備品:
1.取容積為2000ML(2升)的三角瓶,內裝900ML水,蓋上棉塞,外包防潮牛皮紙;
2.將過濾器同聯(lián)結管(和罐體聯(lián)結端管口要塞上棉花,外包上牛皮紙防潮)用高壓消毒鍋滅菌,123℃,維持1小時。無菌水和過濾器,聯(lián)結管冷卻后待用。———注:此步驟要和培養(yǎng)基滅菌同步舉行;
3.當罐內壓力降至0.05mpa時,在火焰保護下接上過濾器聯(lián)結管;
4.開啟氣泵,打開進氣閥,當罐溫降至26℃罐壓調節(jié)至0.05mpa時,舉行接種。
二.專用種瓶要嚴格的依照無菌操作程序進行:
這一操作應在無菌的接種室或者接種箱的超凈工作臺上舉行。在操作過程中要嚴格的依照無菌操作程序舉行。
1.將外部用消毒液或75%的酒精擦試,取下種子瓶棉塞外的牛皮紙,但要保持原來的外形,放在超凈工作臺臺面上,在火焰保護下舉行無菌操作,將棉塞取下,用臺面上的牛皮紙將其包嚴。再取無菌接種鉤,將種子瓶內的專用種搗碎,直至固體專用種松散、無結塊、細而均勻。
2.將搗碎的專用種在火焰保護下,倒進無菌水瓶中,并攪拌均勻。
3.加進抑菌劑,將抑菌劑的外表用消毒水或75%的酒精擦試;在火焰保護下無菌操作,將抑菌劑加進到無菌水瓶中(抑菌劑必需現(xiàn)用現(xiàn)加,不得延誤或者太提前)。
三.無菌環(huán)境下的接種
1.為了形成火焰保護下的無菌環(huán)境,要制備一個略大于進料口的火焰保護圈,在圈上的槽內塞上脫脂棉花,并用95%酒精將其浸濕,備用。再備一條濕毛巾,放到壓力表上,待熄火用。
2.用消毒水或75%的酒精將進料口的外蓋和四面擦試1—2遍。
3.打開放氣閥,放氣完畢后點燃火圈將進料口封蓋擰下,但仍放在原位。
4.關閉放氣閥。將封蓋迅速取下,再在火焰的保護下,將三角瓶的瓶口瓶頸在火焰上灼燒片刻,然后將預備好的專用種倒進罐內,并立馬上進料口封蓋擰緊,用濕毛巾將火圈熄滅。
5.再打開放氣閥將罐壓調整到0.03MPA。將罐內溫渡調到26℃—28℃之間。不同的品種,發(fā)酵溫渡和時間略有不同。溫渡根據(jù)高暖和低溫品種的不同,在25—30℃之間選擇。時間根據(jù)菌種生長情況而定,一般每毫升1000個左右菌球即可(用肉眼瞧菌球在發(fā)酵液中約占1/3—1/2。
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